Звичайна колонка хроматографія
2. Чроматографічна колонка (тип обертання)
3.Chromatographic Conte (посібник)
*** Прайс -список для цілих вище, запитайте нас, щоб отримати
Опис
Технічні параметри
Звичайна колонка хроматографіяВикористовує різницю у співвідношенні розподілу різних речовин між стаціонарною фазою та мобільною фазою, або різними можливостями утримання фіксованих фаз відносно різних речовин, для досягнення поділу речовин. Коли суміш протікає через хроматографічну колонку за допомогою мобільної фази, вона буде взаємодіяти з стаціонарною фазою в колонці (наприклад, розчинення, адсорбція тощо). Через відмінності у фізичних та хімічних властивостях та структурах кожного компонента в суміші також різняться величина та міцність їх взаємодії з стаціонарною фазою. Під однаковою рушійною силою час утримання кожного компонента в стаціонарній фазі відрізняється, так що компоненти в суміші витікають із стовпця в певному порядку, досягаючи поділу.
Параметр
Виявлення залишків пестицидів
 |
 |
 |
 |
Ми часто це говоримоЗвичайна колонка хроматографіяНасправді розділення стовпчики хроматографії, також відоме як стовпчаста хроматографія. Його вперше винайшли та використовували російськими вченими в 1903 році. Він подрібнив розчин рослинних пігментів у порошок карбонату кальцію і знайшов різні кольорові смуги на порошку карбонату кальцію зверху вниз. Отримавшись та витягуючи різні кольорові смуги, було отримано відносно чистий хлорофіл, лютеїн тощо.
Після сто років розвитку цей метод став відносно зрілим, а стаціонарна фаза також перетворилася від одного карбонатного порошку кальцію до глинозему (який можна розділити на кислий, нейтральний, лужний), силікагель, активоване вуглець тощо. Серед них кремнезем є найчастіше в основних лабораторіях, як правило, ділиться на нормальний фазовий гель та зворотний фаза -гель!
Стаціонарна фаза (силікагель), як правило, повинна бути очищена та активована, а розмір частинок повинен бути рівномірним. Теоретично, чим менший розмір частинок і чим більша площа поверхні на одиницю маси, тим вище адсорбційна здатність і тим кращий ефект розділення.
Однак при практичному використанні, коли частинки фіксованої фази занадто малі, часто існує дві ситуації: одна полягає в тому, що вони легші ваги і легко пливуть у повітрі (силікагель не може бути деградований людським тілом, а тим тонше, тим токсичнішим він); По -друге, дрібні частинки також можуть призвести до невеликих зазорів між частинками, що призводить до повільної швидкості потоку розчинника та споживання часу; Входячи з прикладу силікону, найбільший комерційно використаний розмір силікону наразі 200-300 сітка.
З точки зору методів проходження стовпців, крім обладнання для автоматичного аналізу, таких як підготовка циркуляції вперед, ефективна підготовка рідкої фази та згадані раніше машини, що проходять стовпчики, в основному проходження стовпчика в основному поділяються на три типи: проходження стовпця атмосферного тиску, проходження стовпця розгниття та проходження стовпчика тиску.
Серед них розгниття через колонку призводить до низької ефективності адсорбції за рахунок швидкої швидкості потоку елюента, що призводить до втрати більшості кількості лотків та поганої ефективності розділення. Він підходить для відокремлення зразків із відносно відкритими табличками TLC, особливо для зразків з лише однією великою полярною домішкою в продукті; Більшу частину свого часу витрачається на попередню обробку сполук, видаляючи деякі домішки перед ретельним очищенням. Слід зазначити, що випаровування розчинника, спричинене негативним тиском під час використання, може призвести до конденсації великої кількості крапель води на зовнішній поверхні колони. Водні чутливі сполуки не слід легко намагатися.
Атмосферний тиск, що проходить стовпчик, є найбільш ефективним методом розділення між трьома, але оскільки розчинник часто рухається занадто повільно, навіть найкращий ефект розділення може вплинути на ефективність. Тому тиск зазвичай чиниться в цей час, що називається проходженням стовпчика під тиском; Але тиск не повинен бути занадто високим. Як правило, для автоматичної роботи використовується куля з подвійною ланцюгом, а для автоматичної роботи використовується рибний насос. Обидва можуть бути модифіковані, як показано на малюнку.
Звичайний процес схрещування стовпців:
Необхідно проводити підготовчу роботу:
Вибираючи стовпець, зауважте, чи є шліфувальна дошка. Для стовпців без шліфувальних дощок не забудьте наповнити дно трохи бавовни. Бавовна не повинна бути занадто товстою або занадто тонкою, доки він може блокувати силікон від виходу. (Блогер безпосередньо демонтував вішалку для одягу і використав її для вставки бавовни в розетку на вилку)
Підготуйте мінімальну елюенту полярності, УФ -лампу (рекомендується для лабораторного персоналу, портативного, готового сфотографуватись у будь -який час), обладнання для під тиском та тестову стійку для трубки за необхідності!
Виберіть відповідний стовпчик, додайте силіконовий гель, замочіть силіконовий гель і вирівнюйте його
ВибірЗвичайна колонка хроматографіядуже важливий, і їх розмір слід обчислити на основі кількості продукту, який, як правило, може бути розділений на:
Кілька міліграмів колони (остаточний вибір для загального синтезу);
Колона кількох десятків міліграм (методологічний підкладка розширення);
500 міліграм до 1 грам колонки (використовуючи методологію як сировину);
Стовпи близько 5 г і великі лусочки.
Найпоширеніше співвідношення діаметра колонки до висоти в лабораторії, як правило, від 1: 2,5 до 1:15. Кількість силікагелю, що використовується як стаціонарна фаза під час навантаження на зразки, приблизно в 20 - 40 разів перевищує вибірку. Стандарт для вибору стовпців повинен базуватися на ситуації для підйому TLC вашого зразка. Якщо в безпосередній близькості є багато домішок, спробуйте максимально вибрати більшу колонку, щоб ваш зразок міг покрити невеликим тонким шаром (рекомендована товщина нижче 5 мм). Якщо домішки далекі, цю товщину можна природно збільшити, але не рекомендується, щоб товщина вашого зразка перевищувала 2 см, якщо продукт просто не промиваний.
Багато людей помиляються, думаючи, що додавання більше силікону, навіть якщо він товстіший на моєму зразку, чи можна його добре розділити? Ця відповідь негативна!
Причина полягає в тому, що ці люди ніколи не думали, що зразки внизу і вище не бігали на одній лінії, тому вони могли отримати лише чисті, більшість з яких перехрещені, не кажучи вже про нечисті, витрачаючи час і розчинники!
Ось чому зразок вимагає витончення!
Після вибору стовпця додавання силікону можна здійснити за допомогою воронки для годування. У той же час, не забудьте носити маску та працювати в витяжному капоті. Причину цього не буде розроблений блогер (силікоз).
Що стосується інфільтрації силікагелю, то рекомендований процес: спочатку покладіть руку силікагель з силікагелем, встановленим вертикально, вирівнюйте поверхню силікагелю рукою, з'єднуйте дно силікагелю до водяного насоса, викачайте силікагель, а потім вилийте як мінімум полярний елюент зверху. Коли елюент збирається витікати, закрийте відключений клапан, щоб запобігти перекачанню розчинника у водяний насос.
Потім, під тиском, силіконовий гель можна рівномірно, просочений, промиваючи сім -вісім обсягів стовпчиків з найменшою кількістю розвиваючого агента.
Зразок вище
Відбір проб поділяється на мокрий відбір проб і сухість відбору проб.
(1) Вологий відбір проб.
Рекомендований метод полягає в тому, щоб використовувати піпетку з гумовим наконечником, щоб смоктати зразок, близький до верхньої частини силіконового гелю, повільно і рівномірно капати зразок, поки він не закриє шар, потім припиніть додавати зразок і нанести певний тиск, щоб занурити жирну речовину в шар силіконового гелю; Зануріть жирну речовину в силіконовий шар і повторіть цей процес кілька разів, поки всі зразки не завантажуються!
Деяким новим студентам може бути цікаво, чому ця операція проводиться замість покриття мокрого технологічного масла, як речовина, все відразу?
Насправді ця операція може зменшити ефективну висоту шару зразка. На даний момент колонова хроматографія вже розпочалася, а наступні зразки схожі на розчинники, що підштовхують попередні зразки до адсорбу та десорбу в силікагелі.
(2) Що стосується сухої вибірки.
Якщо абсолютно не потрібно, це не рекомендується. Тверді зразки рекомендуються більше побити або кристалізовані. "Рекомендується недобросовісні методи, етилацетат проти води, ультразвукове коливання, що сприяє кристалізації високої киплячої олії" та "обмін лабораторним методом перекристалізації".
Суха вибірка, як правило, приносить дві проблеми; З одного боку, під час процесу змішування зразків можливість реакції між зразком та силікагелем збільшується через необхідність підвищення температури для обертового випаровування; З іншого боку, сухе навантаження означає, що адсорбенти будуть введені в шар зразка, збільшуючи висоту шару зразка або розмір стовпця, що вимагає більше часу та більше розчинника.
Якщо іншого вибору немає, просто вилийте адсорбований порошок повільно в колону для завантаження, з деякими вимогами, подібними до вологих методів.
Додайте безводний сульфат натрію або кварцовий пісок
Для того, щоб уникнути впливу шару зразка під час додавання елюента, викликаючи нерівність, деформацію та вплив на ефективність поділу, шар безводного сульфату натрію або кварцовий пісок, як правило, покладається поверх шару зразка.
Наші інженери особисто віддають перевагу безводному сульфату натрію, оскільки він також має функцію сушіння і є дружнім до розчинників, таких як дихлорметан, які схильні до випаровування, поглинання тепла та конденсації!
Градієнтне елюція, відбір проб та збирання
Після завантаження спочатку промийте стовпчик невеликим полярним розчинником (розчинник, який не дозволить проходити продукту) для 2-3 обсягів стовпця (один об'єм стовпця визначається як обсяг мобільної фази, що протікає і виходить), щоб забезпечити рівномірність, а потім виберіть пропорцію для елюції.
Як вибрати елюент, який проходить через колону?
Співвідношення Eluent - це співвідношення, коли ваш продукт досягає значення RF приблизно 0. 2 на пластині TLC
Це досвід прання стовпців, який я прочитав багато книг і поділився, і фактичний процес також дуже схожий. Особисто я вважаю за краще зменшити градієнт на двічі.
Наприклад, якщо розчинник для скелелазіння тарілки TLC є PE/EA =2: 1, блогер, швидше за все, розпочне градієнтне елюцію з PE/EA =4: 1 і закінчується на PE/EA =2: 1, як правило, призводить до кращих результатів.
Існують також методи, коли збирають елюентів. Спочатку ви можете вибрати більшу пробірку для її отримання, і коли TLC наближається до цільової точки, перейдіть на меншу пробірку. Це може зменшити можливість отримання більше та уникнути домішок.
Якщо ви стикаєтесь із ситуаціями, коли точки домішки та точки продукту близько один до одного, особливо тих, хто має слабку флуоресценцію, пам’ятайте, що не чинять тиск. Натомість виберіть провести стовпчик під нормальним тиском і змінити трубку щоразу, коли з'єднується половина або менше труб, що також може збільшити ймовірність очищення.
Пам’ятайте, що не вчасно впоратися з стовпом!
Багато людей мають звичку припустити, що колона була передана і висушена, коли на наступній стадії немає продукту в одній або двох трубах.
Я лише зрозумів, що врожайність занадто низька, коли я його обчислив, або коли я пішов зробити спектр, я виявив, що спектр невірний і пропустив неправильну точку. Я глибоко пошкодував про це.
Тому рекомендується не поспішати обробляти стовпець після завершення потрібної точки. Натомість виконайте ядерний магнітний резонанс, щоб відповідати врожаю перед обробкою.
Якщо ви зайняті або поспішаєте очистити інші сполуки з цимЗвичайна колонка хроматографія, рекомендується промити високою полярністю доброякісним змішаним розчинником і залишити цю частину елюенту окремо для ідентифікаційних результатів.
Популярні Мітки: Звичайна стовпчаста хроматографія, Китай Звичайні виробники стовпчиків, постачальники, фабрика
Наступний
Класична колонка хроматографіяПослати повідомлення
